摘要   目的：准分子激光上皮下角膜磨镶术后早期使用重组人表皮生长因子衍生物，通过临床观察术后反应，评价外源性表皮生长因子促进角膜上皮修复的作用。方法：采用随机、双盲、平行组对照试验，治疗组58例采用金因舒＋0.1％氟美瞳＋0.3％泰利必妥，对照组60例单用0.1％氟美瞳＋0.3％泰利必妥，术后观察疼痛、畏光、流泪、异物感、混合性充血、角膜上皮混浊6项指标，按无、轻、中、重分别记为0、1、2、3分。术后1、2、3、5天观察术后反应并评分，术后1、2、3周检查视力，术后1、2、3月观察角膜雾状混浊（Haze）发生情况。第5天开始根据指征尽早取镜。结果：术后第1天和第2天治疗组术后反应较轻，差异有统计学意义。治疗组平均取镜时间为5.5天，对照组为6.12天，治疗组早于对照组。两组恢复最佳视力的时间没有显著性差异，术后Haze的发生率和严重程度两组没有显著性差异。结论：重组人表皮生长因子衍生物能减轻LASEK术后早期反应，缩短术后绷带镜片的佩戴时间，安全、无毒副作用，有助于LASEK术后角膜上皮化学性和机械性损伤的修复。

 

Effect of epidermal growth factor on relieving postoperative inflammation and facilitating epithelium recovery after LASEK

 

Yu Zhi-qiang, Chen Chong-da, Li Jin, Zhou Hao, Gan De-kang, Zhou Xing-tao

Department of Ophthalmology, Eye&ENT Hospital, Fudan University, Shanghai 200031, China

Corresponding auther: Yu Zhi-qiang   zhqyu@21cn.com

 

Abstract   Objective：To evaluate the effect of ectogenous EGF on facilitating corneal epithelium recovery after LASEK by observing postoperative inflammation clinically. Methods：A prospective, randomized, double-blindly, parallel group controlled study enrolled 58 patients for treated group with therapy of rhEGF＋0.1％fluorometholone＋0.3％ofloxacin and 60 patients for controlled group with therapy of 0.1％fluorometholone＋0.3％ofloxacin. Pain, photophobia, tearing, foreign body sensation, hyperemia and corneal epithelial opacity were observed at 1, 2, 3 and 5 days postoperatively and scored as 0, 1, 2 or 3 respectively according to negative, slight, moderate or severe degree. Visual acuity was measured at 1, 2 and 3 weeks postoperatively. Corneal haze was examined at 1, 2 and 3 months postoperatively. Band contact lenses were removed as early as possible from 5 days postoperatively. Results：Postoperative inflammation of treated group was significantly slighter than controlled group at 1 and 2 days postoperatively (P<0.05). Average time of removing contact lens is 5.5 days and 6.12 days for treated and controlled group respectively. There was no difference on the time of achieving best uncorrected visual acuity and haze between two groups. Conclusion:：rhEGF may relieve early inflammation postoperatively after LASEK and shorten the time of wearing contact lenses, beneficial to epithelium recovery from chemical and machinical injury.

 

 

准分子激光上皮下角膜磨镶术（LASEK）术后角膜上皮的修复是术后反应和视力恢复的关键。由于制作上皮瓣过程中不可避免地会造成上皮细胞一定程度的损伤，因此尽快恢复角膜上皮结构和功能完整性，可以减轻术后的不适反应，减少感染机会，缩短绷带镜片佩戴时间，促进视力恢复。除了角膜上皮本身的修复机制外，采用外源性生长因子也可以促进角膜上皮的修复，其中表皮生长因子是刺激角膜上皮分裂增殖的主要生长因子。为了评价重组人表皮生长因子衍生物对LASEK术后减轻反应和上皮修复的作用，我们进行了以下研究。

 

1.1  病例选择：1）双眼LASEK术后患者  2）年龄18周岁以上  3）术前最佳矫正视力≥ 1.0  4）屈光度-3～-6D（术前角膜厚度预计能完全矫正）  5）经负责医生确认可以进行跟踪观察的患者  6）排除全身和其他眼部器质性病变

1.2  剔除标准：1）试验中发现不符合入选标准者  2）违反试验方案者  3）因记录不完整而影响疗效观察或未能全程观察者  4）因用药所致不良反应中途退出者

1.3  观察制剂和规格：重组人表皮细胞生长因子衍生物滴眼液（商品名金因舒，深圳市华生元基因工程发展有限公司生产），规格：5000IU/ml  3ml/支，保存条件：4～25℃。

1.4  试验设计  随机、双盲、平行组对照。治疗组58例采用金因舒qid＋0.1％氟美瞳qid＋0.3％泰利必妥qid×1周，对照组60例采用0.1％氟美瞳qid＋0.3％泰利必妥qid×1周，之后常规抗生素、激素滴眼液使用。

1.5  手术方法：乙醇剥离法准分子激光上皮下角膜磨镶术（LASEK），20％乙醇浸润10～12秒，Mel-80准分子激光仪切削，由同一名医生完成手术操作。

1.6  观察指标：疼痛、畏光、流泪、异物感、混合性充血、角膜上皮混浊6项指标，按无、轻、中、重分别记为0、1、2、3分，6项指标评分总和为术后反应总分。

1.7  术后随访：术后1、2、3、5天观察术后反应并评分，术后1、2、3周检查视力，术后1、2、3月观察角膜雾状混浊（Haze）发生情况，由同一名负责医生进行评分。第5天开始根据指征尽早取镜。取镜指征：疼痛0级，异物感0～1级，角膜上皮混浊0～1级，取镜后角膜上皮贴覆良好，瞬目时位置不移动，能正常睁眼，不流泪，异物感0～1级。如取镜后有较强异物感或上皮贴覆不良者，换上新镜片，次日复诊。

1.8  统计方法：Mann－Whitney检验、t检验和卡方检验，用SPSS11.5软件，P<0.05为差异有统计学意义。

 

2.1  术后一般情况  治疗组共完成随访病例58例，男性27例，女性29例，平均年龄28.4岁，平均等效球镜-4.87D，对照组完成随访病例60例，男性30例，女性30例，平均年龄28.7岁，平均等效球镜-4.72D。两组间性别、年龄和屈光度没有显著性差异。上皮瓣均制作成功，无碎瓣、游离瓣。

2.2  两组术后反应比较  治疗组术后1、2、3、5天的平均术后反应总分分别为7.02±3.33、4.98±3.30、4.10±2.70、4.34±2.91，治疗组术后1、2、3、5天的平均术后反应总分分别为8.28±3.77、6.45±3.75、4.05±2.30、4.30±2.46，其中术后第1天和第2天评分经t检验两组间有显著性差异（见表1）。

    治疗组术后1、2、3、5天的术后反应平均秩分别为51.52、52.28、58.53、59.13，治疗组术后1、2、3、5天的术后反应平均秩分别为67.22、66.47、60.44、59.86，其中术后第1天和第2天经Mann－Whitney检验两组间有显著性差异（见表2）。

 

表1  术后第1、2、3、5天两组平均术后反应总分的比较（t检验）

Table 1 Comparision of average scores of inflammation between two groups at 1, 2, 3 and 5days postoperatively（t test）

 

﹡表示有统计学差异（P<0.05）

﹡indicates statistical difference（P<0.05）

 

 

表2  术后第1、2、3、5天两组术后反应平均秩的比较（Mann－Whitney检验）

Table 2 Comparision of average ranks of inflammation between two groups at 1, 2, 3 and 5days postoperatively（Mann－Whitney test）

 

﹡表示有统计学差异（P<0.05）

﹡indicates statistical difference（P<0.05）

 

2.3  平均取镜时间    两组取镜时间见图1。治疗组平均取镜时间为5.5天，对照组为6.12天，两组间有统计学差异（P<0.05）

2.4  术后最佳视力恢复时间    术后第7天达到1.0或以上视力的眼治疗组为18.1%，对照组为19.2%，术后第14天达到1.0或以上视力的眼治疗组为83.8%，对照组为82.5%，术后第21天达到1.0或以上视力的眼治疗组为96.6%，对照组为95.8%。两组间无统计学差异（见图2）。

2.5  术后Haze的发生    术后治疗组28眼出现Haze，对照组31眼出现Haze，均不超过0.5级，两组间无显著性差异（P>0.05）。术后3月时两组Haze全部消退。

 

表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）最早是由Cohen和Levi Montalcini在小鼠的颌下腺中发现的，它是一类广泛存在于人体内，可调节多种细胞生长的内源性生长因子，其受体存在于除造血系统以外的所有组织细胞膜表面。人表皮生长因子（hEGF）由53个氨基酸组成，分子量为6021D，等电点4.6，对酸、热都很稳定。

    在角膜上皮受到创伤时，泪液中EGF的浓度会明显升高，这说明在角膜上皮创伤修复过程中EGF起了很重要的作用^[1]。创伤局部EGF浓度升高，可能时由于创伤部位的EGF受体增多或表达增强，吸引内源性EGF向创伤部位集中^[2]。但是由于患者自身因素或创伤局部因素的影响，创伤局部聚集的EGF可能仍然满足不了创伤快速修复的最大需要，在这种情况下，创伤愈合速度减慢，愈合质量降低，此时就需要通过补充外源性EGF来促进角膜上皮的快速修复。研究表明，外源性EGF对外伤性角膜上皮缺损、碱性化学伤、严重热灼伤、电光性眼炎等角膜上皮损伤具有促进上皮愈合的作用^{[3，4，5，6]}，另外在穿透性角膜移植术后、胬肉切除术后也能加速角膜再上皮化过程^[7，8]。

    准分子激光上皮下角膜磨镶术（LASEK）在手术过程中对角膜上皮造成化学性和机械性的损伤，术后反应和患者舒适度与角膜上皮损伤和修复的程度直接有关，因此术后采用重组人表皮生长因子衍生物，可以促进和加速角膜上皮的修复，从而减轻术后反应，缩短角膜上皮水中消退和愈合的时间。本研究中，LASEK术后第1、2天治疗组术后反应较对照组轻，取镜时间缩短，证实在重组人表皮生长因子衍生物在促进角膜上皮修复中的作用。由于恢复最佳视力所观察的时间点为每周一次，比较粗略，未能发现重组人表皮生长因子衍生物对恢复最佳视力的影响。

    EGF在促进角膜上皮生长的同时也会促进角膜成纤维细胞的增殖，是否会因此引起LASEK术后Haze发生率和程度增加？Yanai等用EGF处理培养的角膜成纤维细胞，可以明显促进成纤维细胞的增殖，并具有抗调亡活性^[9]。但是Lohmann等在发现PRK术后EGF明显升高的同时，并无证据表明EGF浓度与角膜Haze由任何关联^[10]。我们在研究中也未发现治疗组Haze发生率增加或发生程度加重，至少说明5000IU/ml浓度的重组人表皮生长因子衍生物不会因为促进角膜成纤维细胞的增殖而加重Haze的发生。

    表皮生长因子用于眼药水的药理学研究已经表明，这是一种对全身或局部，长期或短期使用都没有毒副作用的药物^[11]。而且制成重组人表皮生长因子衍生物的制剂可以在室温下保持活性，无需冷藏，使用方便，对LASEK术后减轻反应，促进上皮修复有明显效果，缩短佩戴绷带镜片时间，可以作为LASEK术后常规用药选择之一。

 

1.  Sheardown H, Cheng YL. Tear EGF concentration following corneal epithelial wound creation. J Ocul Pharmacol Ther. 1996;12:239-43.

2.  Xu KP, Ding Y, Ling J, et al. Wound-induced HB-EGF ectodomain shedding and EGFR activation in corneal epithelial cells. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2004;45:813-20.

3.  Pastor JC, Calonge M. Epidermal growth factor and corneal wound healing. A multicenter study. Cornea. 1992;11:311-4.

4.  Reim M, Busse S, Leber M, et al. Effect of epidermal growth factor in severe experimental alkali burns. Ophthalmic Res. 1988;20:327-31.

5.  Reim M, Kehrer T, Lund M. Clinical application of epiderm growth factor in patients with most severe eye burns. Ophthalmologica. 1988;197:179-84.

6.  姜双东. 重组人表皮生长因子治疗电光性眼炎. 眼科. 2003;12:29.

7.  林跃生, 王敏华, 陈家祺等. 重组人表皮生长因子促进角膜上皮损伤修复的研究. 中国实用眼科杂志. 2000;18:700-703.

8.  洪慧, 张薇, 刘萍等. 重组人表皮生长因子对翼状胬肉术后角膜上皮的作用. 中国实用眼科杂志. 1999;17   12

9.  Yanai R, Yamada N, Kugimiya N, et al. Mitogenic and antiapoptotic effects of various growth factors on human corneal fibroblasts. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2002;43:2122-6.

10.  Lohmann CP, Hoffmann E, Reischl U. Epidermal growth factor (EGF) in tears in excimer laser photorefractive keratectomy. Responsible for postoperative refraction and ""haze""? Ophthalmologe. 1998;95:80-7.

11.  叶益新, 黄秉仁, 莫冬海. 表皮生长因子眼药水的毒理学研究. 中国医学科学院学报. 2001;23:137-140.